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1、SDS裂解液是一種比較強烈的細胞組織裂解液，常用于組織細胞中難溶蛋白的裂解。

2、本產(chǎn)品具有有強烈的蛋白變性作用，不能用于非變性蛋白方面的研究。

3、本產(chǎn)品裂解得到的蛋白樣品可用于常規(guī)的Western、ChIP(染色質(zhì)免疫共沉淀，chromatin immunoprecipitation)等。

4、由于含有較高濃度的去垢劑，不能用Bradford法測定由本產(chǎn)品裂解得到樣品的蛋白濃度。建議使用晶彩生物生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。

原理：

   陰離子去垢劑SDS促進細胞膜的崩解，特別適用于膜蛋白或者細胞骨架蛋白的裂解。

操作步驟：

對于培養(yǎng)細胞樣品：
1、融解SDS裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM。
2、對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150—250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后，細胞就會被裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘。
3、充分裂解后，10000-14000rpm離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加入150ul裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200ul或250ul。如果用于ChIP，建議6孔板每孔細胞至少加入200ul裂解液。

對于組織樣品：
1、把組織剪切成細小的碎片。
2、融解SDS裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM。
3、按照每20毫克組織加入150—250ul裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)；
4、用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。如果用于ChIP，初步裂解后需在冰浴上繼續(xù)裂解10分鐘；
5、充分裂解后，10000-14000rpm離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和ChIP等操作；
6、如果組織樣品本身非常細小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

可以制備樣品數(shù)：